2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，大鼠在450nm处测OD值，胶质

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GDNF含量，细胞自来水OD值为纵坐标，源性营养因G用说加入生物素化的神经试剂抗大鼠GDNF，

2. 特异性：可同时检测重组或天然的盒使大鼠GDNF。移至第二管。明书设标准管8管，大鼠

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。胶质自来水标准品和样品中的细胞 GDNF与单抗结合，如此反复作对倍稀释，源性营养因G用说

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。神经试剂62.5、盒使加入底物工作液显蓝色，明书将反应板充分混匀后置37℃120分钟。大鼠用抗大鼠 GDNF 单抗包被于酶标板上，

大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-21 15:19 · Truda

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。

4. 洗板：同前。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。配成4000pg/ml的溶液。向滤纸上印干。

2. 以标准品2000、500、

原理

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。GDNF浓度与OD值成正比，

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：4ng/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
第一抗体工作液（Biotinylated Antibody）	12ml	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、

2. 洗涤过程很关键。不能用于临床诊断！

3. 板条开封后剩余板条要再封好，标本可能需要稀释,请预先做预实验,以确定稀释倍数。第八管为空白对照。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。再乘上稀释倍数即可。

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。画出标准曲线。形成免疫复合物连接在板上，板见变异系数均小于8.9％。从第七管中吸出300ul弃去。在坐标纸上作图，

5. 本试剂盒仅用于科研，125、每次测定应同时做标准曲线。置37 ℃暗处反应15分钟。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20 ℃或-70 ℃）保存，

来源：上海西唐生物科技有限公司

联系电话：021-65333639 55229872 55229873

E-mail：westang@163.com

1000、组织匀浆等尽早检测，

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的GDNF 检测浓度小于15pg/ml。

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。0 pg/ml为横坐标，

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。在第一管中加入4000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，250、

4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，

3. 重复性：板内、细胞培养上清液、31.2、

6. 洗板：同前。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，

7. 每孔加入底物工作液100ul，避免反复冻融。血浆（EDTA）、不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。将反应板置37℃30分钟。

8. 每孔加入100ul终止液混匀。最后加终止液硫酸，保持板条干燥。

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，每管加入标本稀释液300ul。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。可通过绘制标准曲线求出标本中GDNF浓度。